在实验时将大鼠elisa试剂盒从冰箱中拿出来即用，而忽略了这种做法有可能影响后面温育时间不够的问题，其直接的后果是对一些弱阳性标本的检测出现假阴性。在实验开始前，将大鼠elisa试剂盒先从冰箱中拿出来，在室温下放置20分钟以上后，再进行测定，以使大鼠elisa试剂盒在使用前与室温平衡。这样做的目的，主要是为了在后面的温育反应步骤中，能使反应微孔内的温度能较快地达到所要求的高度，以满足测定要求。其次，目前的商品大鼠elisa试剂盒中的洗板液均需在实验室使用时对所提供的浓缩液稀释配制，因此稀释时所用的蒸馏水或去离子水应。此外，当大鼠elisa试剂盒以opd为底物时，则底物溶液应在反应显色前临时配制。
    用于大鼠elisa试剂盒测定的标本为常用的是血清（浆），有时因为特定的检测目的，也用到唾液、脑脊液、尿液、粪便等标本。目前上使用血清标本测定的标志物一般有传染原体的抗原和抗体、特种蛋白、。对用于激素和药物测定的血清标本的收集，要注意收集时间甚或有可能会对测定结果产生影响。
     如在早晨4～6点之间，会有一峰值出现：生长激素、促黄体激素（lh）和促卵泡激素（fsh）均以阵发性方式释放，因此，在测定此类激素时，有在密切相连的时间间隔内采取数份血样本，以其中间值为测定值。又如当从卧位变为站立位时，血清中肾素活性将出现明显增高。再如药物的检测，应根据药代动力学选择服药后的适时间抽血检测。用于传染原体的抗原和抗体、标志物和特种蛋白等的检测的血清标本的收集则没有时间和方面的影响，只是在处理和保存方面要考虑以下几个方面：
（1）要注意避免出现溶血。白中含有血红素基团，其有类似化物的活性，因此，在以hrp为标记酶的大鼠elisa试剂盒测定中，如血清标本中白浓度较高，则其就很容易在温育过程中吸附于固相，从而与后面加入的hrp底物反应显色。
（2）样本的采集及血清分离中要注意尽量避免污染，一则的生长，其所分泌的一些酶可能会对抗原抗体等蛋白产生分解作用；二则一些的内源性酶如大肠杆菌的β-半乳糖苷酶本身会对用相应酶作标记的测定方法产生非特干扰。
（3）血清标本如是以无菌操作分离，则可以在2～8℃下保存一周，如为有菌操作，则建议冰冻保存。样本的长时间保存，应在-70℃以下。
（4）冰冻保存的血清标本须注意避免因停电等造成的反复冻融。标本的反复冻融所产生的机械剪切力将对标本中的蛋白等分子产生破坏作用，从而引起假阴性结果。此外，冻融标本的混匀亦应注意，不要进行剧烈振荡，反复颠倒混匀即可。